細胞消化小知識

細胞消化小知識

    在進行原代培養過程中需分離組織和分散細胞,在傳代中要使細胞脫離附著的底物時,均需要使用到消化液。組織細胞培養中常用于消化細胞的溶液有胰蛋白酶,可以單獨使用也可以和EDTA混合使用。

胰蛋白酶消化細胞與細胞種類及細胞的特性有關。常用胰蛋白酶的濃度為0.25%和0.05% pH7.6左右,溫度為37℃時作用效果最佳。

EDTA是一種化學螯合劑,對細胞有一定的解離作用,毒性小,使用方便。常用濃度為0.02%,用不含鈣鎂離子的D-Hanks平衡鹽溶液配制。常和胰蛋白酶一起使用,輔助胰蛋白酶消化細胞。


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注意:

    1、鈣、鎂離子和血清蛋白的存在會降低胰蛋白酶活力。故胰酶溶液常用不含鈣鎂離子的D-Hanks平衡鹽溶液配制成0.25%溶液。

2、消化細胞時加入含血清的培養液或胰蛋白酶抑制劑能終止胰蛋白酶對細胞的消化作用。

3、使用EDTA處理細胞后一定要用D-Hanks平衡鹽溶液或者PBS緩沖液徹底沖洗干凈,因為殘留的EDTA會使細胞脫壁,影響細胞生長。

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